不能重新申请交通事故认定，但是对事故认定有异议的，可以向上一级申请复核。并且只可申请一次。根据相关法律规定，当事人对交通事故认定不服的，可以在收到交通事故认定书之日起三日内向上一级公安机关提出书面的复核申请。

一、交通事故认定书不服该怎样办

根据我国目前的相关法律规定，如果当事人对交通事故认定书不服，可以从道路交通事故认定书送达当天开始计算，三日内向上一级公安机关交通管理部门提出书面复审申请。受害人有充分理由和证据证明交通事故认定责任错误的，有权申请复审，并请求上一级交通管理部门予以变更或者撤销。《道路交通事故处理程序规定》第五十一条：当事人对道路交通事故认定有异议的，可以自道路交通事故认定书送达之日起三日内，向上一级公安机关交通管理部门提出书面复核申请。

二、不服道路交通事故认定该怎么办

不服道路交通书事故认定书的，当事人可以书面复核申请。《道路交通事故处理程序规定》第五十一条规定，当事人对道路交通事故认定有异议的，可以自道路交通事故认定书送达之日起三日内，向上一级公安机关交通管理部门提出书面复核申请。复核申请应当载明复核请求及其理由和主要证据。第五十四条第一款规定，上一级公安机关交通管理部门经审查认为原道路交通事故认定事实不清、证据不确实充分、责任划分不公正、或者调查及认定违反法定程序的，应当作出复核结论，责令原办案单位重新调查、认定。

三、事故认定书不认同怎么办

行政救济途径：当事人对道路交通事故认定有异议的，可以自道路交通事故认定书送达之日起三日内，向上一级公安机关交通管理部门提出书面复核申请。上一级公安机关交通管理部门经审查认为原道路交通事故认定事实不清、证据不确实充分、责任划分不公正、或者调查及认定违反法定程序的，应当作出复核结论，责令原办案单位重新调查、认定。