二审不能进行笔迹鉴定，具体情况如下：

1、民事案件审理中，当事人对于自己的主张，有责任提供证据。人民法院根据案件审理情况，确定当事人应该提供证据及期限。

2、对于一审没有申请笔迹鉴定的，或者申请鉴定又撤销申请，没有充足理由的，在二审审理时候不能再申请鉴定；如果是一审已经申请鉴定，因为一审法院没有法律依据却不予批准的，或者其他原因导致鉴定未能做出的，可以再申请鉴定。

比较书写动作一般状况特征、文字布局特征、书面语言特征的相同与不同；比较单字或笔画单个特征的相同与不同；比较各组特征的相同与不同；比较各类特征的相同与不同；对于字迹多的检材，比较检验时要对上述四方面的相同特征和不同特征进行精确地统计分析，用数学方法反映书写习惯的量与质方面的异同。比较笔迹特征异同的方法，是以目力观察比较为主，并借助于摄影仪、比较显微镜、幻灯片进行形态比较。

一、《民事诉讼法》

第六十四条

当事人对自己提出的主张，有责任提供证据。

当事人及其诉讼代理人因客观原因不能自行收集的证据，或者人民法院认为审理案件需要的证据，人民法院应当调查收集。

人民法院应当按照法定程序，全面地、客观地审查核实证据。

第六十五条

当事人对自己提出的主张应当及时提供证据。

人民法院根据当事人的主张和案件审理情况，确定当事人应当提供的证据及其期限。当事人在该期限内提供证据确有困难的，可以向人民法院申请延长期限，人民法院根据当事人的申请适当延长。当事人逾期提供证据的，人民法院应当责令其说明理由；拒不说明理由或者理由不成立的，人民法院根据不同情形可以不予采纳该证据，或者采纳该证据但予以训诫、罚款。