1、对于诉讼时效的抗辩，当事人应当在一审宣判前提出。可以在提交答辩状时向法院提出，也可以在开庭审理过程中口头向法庭提出。

2、一审宣判后，在二审程序中提出的，人民法院不予支持。但有新证据证明超过诉讼时效的，可以在二审中提出诉讼时效抗辩。

《最高法院关于民事案件诉讼时效的规定》

第四条当事人在一审期间未提出诉讼时效抗辩，诉讼时效抗辩答辩权在二审期间提出的，人民法院不予支持，但其基于新的证据能够证明对方当事人的请求权已过诉讼时效期间的情形除外。

诉讼时效抗辩是一种法律行为，是指当事人行使诉讼时效抗辩权的法律行为，也可以理解为已经进入诉讼阶段，对对方当事人违反有关“诉讼时效”相关规定，当事人可以向法院提出“诉讼时效抗辩”，请求驳回对方当事人的诉讼请求的情况。

当事人在一审期间未提出诉讼时效抗辩，在二审期间提出的，人民法院不予支持，但其基于新的证据能够证明对方当事人的请求权已过诉讼时效期间的情形除外。

诉讼时效只适用于债权请求权，即当事人可以对债权请求权提出诉讼时效抗辩。所谓债权请求权，是指权利人基于债的关系而产生的、请求特定人为特定行为的权利。根据相关规定，当事人可以对债权请求权提出诉讼时效抗辩，但对下列债权请求权提出诉讼时效抗辩的，人民法院不予支持：

(1)支付存款本金及利息请求权；

(2)兑付国债、金融债券以及向不特定对象发行的企业债券本息请求权；

(3)基于投资关系产生的缴付出资请求权；

(4)其他依法不适用诉讼时效规定的债权请求权。

我国《民法典》对诉讼时效的规定：

第一百八十八条【普通诉讼时效、最长权利保护期间】向人民法院请求保护民事权利的诉讼时效期间为三年。法律另有规定的，依照其规定。

诉讼时效期间自权利人知道或者应当知道权利受到损害以及义务人之日起计算。法律另有规定的，依照其规定。但是，自权利受到损害之日起超过二十年的，人民法院不予保护，有特殊情况的，人民法院可以根据权利人的申请决定延长。

第一百八十九条【分期履行债务的诉讼时效】当事人约定同一债务分期履行的，诉讼时效期间自最后一期履行期限届满之日起计算。

第一百九十条【对法定代理人请求权的诉讼时效】无民事行为能力人或者限制民事行为能力人对其法定代理人的请求权的诉讼时效期间，自该法定代理终止之日起计算。

第一百九十一条【受性侵未成年人赔偿请求权的诉讼时效】未成年人遭受性侵害的损害赔偿请求权的诉讼时效期间，自受害人年满十八周岁之日起计算。

第一百九十二条【诉讼时效期间届满的法律效果】诉讼时效期间届满的，义务人可以提出不履行义务的抗辩。

诉讼时效期间届满后，义务人同意履行的，不得以诉讼时效期间届满为由抗辩；义务人已经自愿履行的，不得请求返还。